riboPOOL 核糖体RNA去除
工作流程快:一步法,完整工作流程仅用时70min
起始量范围广泛:在100 ng到5μg的RNA起始量之间都有很好的去除效率
高效的去除:去除效率高,结果稳定可重复
- 产品简介
- 工作流程
- 实验数据
- 人源/小鼠/大鼠
- 植物通用型
- 原核通用型
ribo POOL 灵活高效的去除核糖体RNA
核糖体RNAs(rRNA)约占RNA-Seq数据读取量的90%,去除后可大大节省RNA-seq的测序成本。
riboPOOL可以高效和特异性地去除rRNAs,适合各种模式和非模式物种或RNA序列。
产品特点:
种类丰富:丰富的成品型目录可供选择,目录持续更新中;目录以外物种或RNA可以定制
工作流程快:一步法,完整工作流程仅用时70min
起始量范围广泛:在100 ng到5μg的RNA起始量之间都有很好的去除效率
针对特殊应用定向优化:ibosome profiling样本;环境转录组学(如土壤、污泥)
高效的去除:去除效率高,结果稳定可重复
搭配灵活:兼容各种RNA纯化和RNA建库方法
探针法:没有酶切偏好,可以均一的覆盖转录本;无打断样本风险;适用于无polyA结构的RNA(如snoRNA,LncRNA, 组蛋白)
兼容多种下游分析方法:如RNA-Seq、微阵列分析和实时定量PCR等
可混合使用:客户可根据样本的组成比例,混合使用2-4种riboPOOL,如病原体感染的人体组织(人源+原核通用型)、人血液样本(人源+人血珠蛋白)、植物微生物群研究(植物通用型+原核通用型)
目录 成品型 riboPOOLs
通用型riboPOOLs | 真核生物riboPOOLs |
003 原核通用型 | 005 酿酒酵母 |
026 细菌通用型 | 006 丝状真菌 |
031 植物通用型 | 007 果蝇 |
032 鸟类通用型 | 008 拟南芥 |
027 古细菌通用型 | 009 水稻 |
035 放线菌通用型 | 010 斑马鱼 |
041 哺乳动物通用型 | 011 堡礁海绵 |
044 海绵通用型 | 014 丝毛鼠(龙猫) |
050 人鼠Ribo-seq | 017 蛤蜊 |
053 人鼠高质量样本 | 019 毕氏酵母 |
056 人鼠(低质量/FFPE样本) | 020 珀蝽 |
原核生物riboPOOLs | 024 玉蜀黍黑粉菌 |
004 大肠杆菌 | 028 涡虫 |
012 枯草芽孢杆菌 | 029 家蚕 |
013 新月柄杆菌 | 030 扁虱 |
015 产气荚膜梭菌 | 033 石藻 |
016 盐富饶菌 | 047 伊蚊 |
018 铜绿假单胞菌 | 059 裂殖酵母 |
021 金黄色葡萄球菌 | 060 鸡 |
022 沙门氏菌 | 061 果蝇(降解样本) |
023 寡氧单胞菌 | 062 线虫 |
高丰度mRNA | 063 牡蛎 |
025 人血珠蛋白 | |
034 Poly-A | |
038 SARS-CoV-2 |
riboPOOL 工作流程
ribo POOL 有效起始量范围(100ng-5ug)
ribo POOL 可混合使用(复合型)
复合型ribo POOL,可根据客户样本组成混合2-4种成品型riboPOOL.
测试样本为(a)SW48 细胞 (人源), NIH3T3细胞 (小鼠)和DH10B株大肠杆菌RNA混合物。
实验比较(b)单独使用人源、鼠源、原核通用型riboPOOL和(c)使用复合型riboPOOL(由1:1:1的人源、鼠源、原核通用型riboPOOL混合构成),两者均可有效去除1μg RNA混合样本中的rRNA.
rRNA的去除效率用生物分析仪,或rtqPCR分析评估(用rRNA或GAPDH(管家基因)特异性的引物进行实时定量PCR )。
人源/小鼠/大鼠riboPOOLs
可去除细胞质rRNA (28S, 18S, 5.8S & 5S rRNA)&线粒体rRNA
高质量RNA(RIN >7),rRNA去除效率可达97%-98%
降解RNA/FFPE(RIN <7),rRNA去除效率可达87%-98%
Ribo-Seq(30nt片段),优化不易去除区域探针密度,rRNA去除效率约75%
*不同实验方案间有一定差异
riboPOOL的rRNA去除效率高约10%
两种试剂的可重复性相当
植物通用型(被子植物)
可去除细胞质(28S, 18S, 5.8S & 5S) 、质体和线粒体 rRNA
广泛覆盖开花植物
适合叶片、种子和根等各种组织部位
植物通用型 riboPOOL 可以覆盖开花植物的主要门类
包括30 多个目(见下图)常见物种,如下:
水稻 · 麻疯树 · 大豆·土豆 · 棉花 · 咖啡·胡萝卜 · 洋蓟 · 橄榄·拟南芥 · 玉米 · 翠菊·小麦 · 苹果 · 橙子·荞麦 · 及其他
植物通用型 riboPOOL的β测试结果
开花植物的去除效率大于91%
值得注意的是,在原始藻类绿藻中rRNA去除效率为80%,表明植物通用型riboPOOL可以应用于被子植物以外的植物门类。
原核通用型(细菌/古生菌)
覆盖广泛的原核生物(细菌/古生菌),适合微生物培养物、宏基因组、微生物组群分析
去除目标涵盖 5S, 16S and 23S rRNA
原核通用型 riboPOOL设计依据
基于76个代表性物种的rRNAs 序列设计的微生物通用型 riboPOOL,适合图中所示的类群(内圈,粗体)和亚群(外圈)所涵盖的细菌和古细菌。
*如果您感兴趣的物种不属于这些类群或亚群,请咨询我们的定制型riboPOOLs产品。
**译注:暂无中文译名
原核通用型riboPOOL已验证物种(RNA-Seq)
测试结果来自不同的实验室,rRNA去除效率从~50-98%不等,在大多数物种中rRNA去除效率> 70% 。去除效率可能因样品类型和实验条件的不同而不同。高质量的RNA样本中效率最高。推荐的起始RNA投放量为100 ng - 5 μg。
已检测的物种 | 去除效率验证 |
大肠杆菌 | √ |
鼠伤寒沙门氏菌 | √ |
霍乱弧菌 | √ |
金黄色葡萄球菌 | √ |
凯伍热厌氧菌 | √ |
鲍氏不动杆菌 | √ |
恶臭假单胞菌 | √ |
热醋穆尔氏菌 | √ |
紫色杆菌 | √ |
具核梭杆菌 | √ |
幽门螺杆菌 | √ |
空肠弯曲杆菌 | √ |
艰难梭菌 | √ |