CN EN
P
产品中心
Product center

myTXTL无细胞蛋白表达系统

操作简单—只需要将DNA模板和myTXTL Master Mix混合

使用方便—只需标准的实验室设备

快速—不需要转化、克隆筛选或者进行细胞裂解

联系我们
  • 产品简介
  • 工作流程
  • 实验数据

myTXTL 无细胞蛋白表达系统 — 数小时表达出目的蛋白


myTXTL是一种简单快速的蛋白质体外表达系统。基因的转录(Transcription,TX)和翻译(Translation,TL)基于大肠杆菌的内源的TXTL机制,在体外建立高效的无细胞反应体系。同时,又保证了T7表达系统的兼容性,为您的研究提供更多的灵活性。


产品特点:

  • 操作简单—只需要将DNA模板和myTXTL Master Mix混合

  • 使用方便—只需标准的实验室设备

  • 快速—不需要转化、克隆筛选或者进行细胞裂解

  • 灵活—适用质粒,线性DNA或者RNA

  • 通用性—兼容T7表达系统

  • 产量高–单个TXTL反应表达的蛋白可以用于多个后续实验


产品应用:

1、蛋白表达

  • 高通量筛选

  • 适用于难以表达蛋白质

  • 体外蛋白质分子定向进化

  • 蛋白质功能鉴定

  • 分子间互作分析

  • 可溶蛋白和膜蛋白表达


2、合成生物学

  • 基因调控网络构建

  • 噬菌体生产

  • 快速成型



产品系列

  • myTXTL Sigma70 Master Mix Kit

基于E.coli的裂解液,Ready-toUse预混液,适用于质粒模板的微量反应体系(12 μL),根据需求反应体系可适度增大。

  • myTXTL Linear DNA Expression Kit

适用于线性DNA和质粒模板的蛋白表达。利用自动化液体处理设备,可以高通量筛选合成的基因片段或PCR产物的大型DNA文库。

  • myTXTL T7 Expression Kit

表达T7启动子驱动的质粒和基因片段。该系统提供了T7 RNA聚合酶的共表达,用于T7驱动结构体的连续转录和翻译。

  • myTXTL TOOL BOX 2.0(质粒产品)

我们提供超过100种含有不同启动子和开放阅读框(ORFs)的质粒,来研究基因调控和分子转化。ORFs包括广泛使用的转录因子、TXTL调节元件和荧光报告蛋白,以此构建复杂的基因调控电路(gene circuits)。


产品列表:

货号

产品名称

规格

产品组分

505024

myTXTL T7 Expression Kit

24rxns

Sigma70 Master Mix

P70a(2)-deGFP Positive Control Plasmid

505096

myTXTL T7 Expression Kit

96rxns

507024

myTXTL Sigma70 Master Mix Kit

24rxns

LS70M aster Mix

P70a-deGFP Linear Positive Control Fragment

507096

myTXTL Sigma70 Master Mix Kit

96rxns

508024

myTXTL Linear DNA Expression Kit

24rxns

LS70MasterMix

P70a-T7rnap HP

T7p14-deGFP HP

508096

myTXTL Linear DNA Expression Kit

96rxns

产品是干冰运输,-80℃储存,有效期1年。建议分装储存,避免反复冻融。


myTXTL TOOL BOX 2.0(质粒清单)


货号

名称

502001

pTXTL-P19a-deGFP

502002

pTXTL-P19a-deCFP

502003

pTXTL-P19a-deYFP

502004

pTXTL-P19a-NtrC

502005

pTXTL-P19a-S24

502006

pTXTL-P19a-OmpA-S24

502007

pTXTL-P19a-S28

502008

pTXTL-P19a-S28-ssrA

502009

pTXTL-P19a-S38

502010

pTXTL-P24a-deGFP

502011

pTXTL-P24a-S28

502012

pTXTL-P24a-OmpA-S38

502013

pTXTL-P24a-S28-ssrA

502014

pTXTL-P24a-S38

502015

pTXTL-P28a-AH

502016

pTXTL-P28a-AH-eGFP

502017

pTXTL-P28a-CI-ssrA

502018

pTXTL-P28a-aH-eGFP

502019

pTXTL-P28a-deGFP

502020

pTXTL-P28a-deGFP-ssrA

502021

pTXTL-P28a-deYFP

502022

pTXTL-P28a-flgM

502023

pTXTL-P28a-flgM-ssrA

502024

pTXTL-P28a-Luc

502025

pTXTL-P28a-mApple

502026

pTXTL-P28a-MazF-ssrA

502027

pTXTL-P28a-MazE-ssrA

502028

pTXTL-P28a-MreB

502029

pTXTL-P28a-MreC

502030

pTXTL-P28a-NtrC

502031

pTXTL-P28a-S19

502032

pTXTL-P28a-S19-ssA

502033

pTXTL-P28a-S24-ssrA

502034

pTXTL-P28a-OmpA-S24-ssrA

502035

pTXTL-P28a-S38

502036

pTXTL-P28a-S54

502037

pTXTL-P28a-TetR

502038

pTXTL-P28a-Venus-MreB

502039

pTXTL-P28a-Venus-MreB-18L

502040

pTXTL-P32a-deGFP

502041

pTXTL-P38a-deGFP

502042

pTXTL-P38a-NtrC

502043

pTXTL-P38a-S19

502044

pTXTL-P38a-S19-ssrA

502045

pTXTL-P38a-S28

502046

pTXTL-P38a-S28-ssrA

502047

pTXTL-P38a-S54

502048

pTXTL-P54a-deGFP

502049

pTXTL-P54a-S19

502050

pTXTL-P54a-S24

502051

pTXTL-P54a-S28

502052

pTXTL-P54a-S38

502053

pTXTL-P70a-ClpXP

502054

pTXTL-P70a-Cl-ssrA

502055

pTXTL-P70a-deCFP

502056

pTXTL-P70a-deGFP

502057

pTXTL-P70a-deGFP-ssrA

502058

pTXTL-P70a-deYFP

502059

pTXTL-P70a-dmVenus

502060

pTXTL-P70a-dTomato

502061

pTXTL-P70a-mApple

502062

pTXTL-P70a-mCherry

502063

pTXTL-P70a-mmCherry

502064

pTXTL-P70a-MGapt1

502065

pTXTL-P70a-MGapt-deGFP

502066

pTXTL-P70a-mRuby

502067

pTXTL-P70a-S19

502068

pTXTL-P70a-S19-ssrA

502069

pTXTL-P70a-S24

502070

pTXTL-P70a-OmpA-S24

502071

pTXTL-P70a-NtrC

502072

pTXTL-P70a-S28

502073

pTXTL-P70a-S28-ssrA

502074

pTXTL-P70a-S28-YbaQ

502075

pTXTL-P70a-S32

502076

pTXTL-P70a-S32-ssrA

502077

pTXTL-P70a-S38

502078

pTXTL-P70a-OmpA-S38

502079

pTXTL-P70a-S54

502080

pTXTL-P70a-TagRFPT1

502081

pTXTL-P70a-T3rnap

502082

pTXTL-P70a-T7rnap

502083

pTXTL-P70a-U3-deGFP

502084

pTXTL-P70a-U4-deGFP

502085

pTXTL-P70a-U5-deGFP

502086

pTXTL-P70a-Venus

502087

pTXTL-P70b-deGFP

502088

pTXTL-P70b-MGapt1

502090

pTXTL-P70b-U3-deGFP

502091

pTXTL-P70b-U4-deGFP

502092

pTXTL-P70c-deGFP

502093

pTXTL-P70c-MGapt1

502095

pTXTL-P70c-U3-deGFP

502096

pTXTL-P70c-U4-deGFP

502097

pTXTL-P70d-deGFP

502098

pTXTL-PLtet01-deGFP

502099

pTXTL-PLtet01-deGFP-ssrA

502100

pTXTL-PLtet01-deGFP-YbaQ

502101

pTXTL-PLlac01-deGFP

502102

pTXTL-pC-MGapt1

502103

pTXTL-pCa-deGFP

502104

pTXTL-T3P-deGFP

502105

pTXTL-T7p7-deGFP

502106

pTXTL-T7p7-MGapt

502107

pTXTL-T7p8-deGFP

502108

pTXTL-T7p8-MGapt

502109

pTXTL-T7p11-deGFP

502110

pTXTL-T7p11-MGapt

502111

pTXTL-T7p14-deGFP

502112

pTXTL-T7p14-MGapt

502113

pTXTL-T7p14-AH

502114

pTXTL-T7p14-AH-eGFP

502115

pTXTL-T7p16-deGFP

502116

pTXTL-T7p16-MGapt

502117

pTXTL-P70a-deGFP HP

502118

pTXTL-P28a-T7rnap

502119

pTXTL-P70a-broccoli

502120

pTXTL-P70a-cI

502121

pTXTL-P70a-luc

502122

pTXTL-P70b-broccoli

502123

pTXTL-P70e-broccoli

502124

pTXTL-P70e-deGFP

502125

pTXTL-PLlacO1-deGFP

502126

pTXTL-PLlacO1-deCFP

502127

pTXTL-PLlacO1-tetR

502128

pTXTL-PLtetO1-lacO1

502129

pTXTL-PLtetO1-tetR

502130

pTXTL-T7p14-Luc

502131

pTXTL-P28a-tetR-ssrA

502132

pTXTL-P28a-tetO1-deGFP-ssrA

502133

pTXTL-PLtetO1-mmCherry-ssrA

502134

pTXTL-P70a-T7rnap HP

502136

pTXTL-T7p14-deGFP HP

502138

pTXTL-P70a(2)-deGFP HP


image.png

image.png

图1. 使用myTXTL无细胞蛋白表达系统表达蛋白(12-160 kDa)

使用含P70a或T7启动子的5-10 nM的DNA模板建立11个12 µL myTXTL反应体系,并在29℃孵育16小时。经丙酮沉淀后,每个反应取1µL进行SDS-PAGE电泳。目的蛋白用橙色标识符标记。M:Marker(10-250kDa);Neg:没有模板DNA;GamS:截短的核酸酶抑制剂蛋白Gam;CALM:钙调素样蛋白3;DHFR:二氢叶酸还原酶;CAT:氯霉素乙酰基转移酶;deGFP:增强型GFP突变体;RLuc:Renilla荧光素酶;FLuc:萤火虫荧光素酶;T7Pol:T7RNA聚合酶;bGal:β-半乳糖苷酶;dCas9:dead Cas9。

image.png

图2. 使用myTXTL表达阳性对照deGFP蛋白。

图A是将myTXTL Sigma70 Master Mix与deGFP对照质粒混合后的效果,图B是将图A的混合物进行29℃孵育后的效果,图C是表达的deGFP在紫外光下发出荧光的效果。

image.png

图3. 质粒浓度对蛋白产量的影响。

内源性大肠杆菌TXTL机制(核心RNA聚合酶和σ70因子)调节P70a载体上的基因表达。

image.png

图4. 双质粒基因表达网络

T7 RNA聚合酶的共表达促进T7启动子控制的基因在myTXTL系统中的表达。


TOP